Skip to content

Warianty genetyczne w C5 i słaba odpowiedź na Eculizumab AD 7

2 miesiące ago

470 words

Wpływ japońskiego polimorfizmu C5 na właściwości funkcjonalne C5. Wskazano wiązanie ekulizumabu do rekombinowanego C5 (rC5) z mutacją i bez niej, co oceniono za pomocą powierzchniowego rezonansu plazmonowego. Ekulizumab wiązał rC5, ale nie wiązał zmutowanego rC5 (rC5m) w stężeniach poniżej 5 nM. Zwiększenie stężenia ekulizumabu do .M nie wywołało wykrywalnego wiązania z rC5m. Jednostka odpowiedzi (RU) to .g białka na milimetr kwadratowy na powierzchni czujnika. Pionowa linia w 650 sekund oddziela fazy włączania i wyłączania eksperymentu kinetyki (połączenie analitu z dysocjacją z ligandu). Aby ocenić wpływ zmiany genetycznej na funkcję C5, wygenerowano elektroforetycznie czyste rC5 i rC5m zawierające c2665G> A i porównano funkcjonalnie w różnych doświadczeniach in vitro. Jako wstępny eksperyment potwierdzono, że naturalne C5 (nC5), rC5 i rC5m odtwarzały lizę szlaku klasycznego równoważnie po dodaniu do serum zubożonego w C5 (dane nie przedstawione). Ekulizumab nie blokował lizy szlaku klasycznego w surowicy rekonstytuowanej za pomocą rC5m, ale blokował zależną od rC5 i zależną od NC5 lizę (ryc. S4A w dodatku uzupełniającym). W przeciwieństwie do tego, jak zaobserwowano dla próbek surowicy pobranych od pacjentów, N19-8 hamowało lizę w surowicy zubożonej w C5 odtwarzanej za pomocą nC5, rC5 i rC5m (ryc. S4B w dodatku uzupełniającym). Wreszcie, chociaż ekulizumab wiązał nanomolowe stężenia rC5 na powierzchniowo-plazmo-rezonansowej analizie, z jasnymi fazami asocjacji i dysocjacji, nie było wykrywalnego wiązania z rC5m w tym samym teście aż do najwyższego stężenia badanego ekulizumabu (1 .M) (Figura 4). ).
C5 Mutacja u argentyńskiego pacjenta ze słabą odpowiedzią
Jeden pacjent ze słabą odpowiedzią na ekulizumab, u którego poziom LDH pozostawał znacząco podczas leczenia ekulizumabem, skierowano do nas z Argentyny. Pomimo, że znany polimorfizm C5, c.2654G . A, nie został zidentyfikowany u tego pacjenta, nowa mutacja, c 2665C . T, która przewiduje p.Arg885Cys, została wykryta w bazie obok znanego polimorfizmu (Figura 3A).
Aby określić częstość występowania i dystrybucję tego nowego wariantu, zbadano te same panele DNA, które opisano powyżej, ale nie zidentyfikowano mutacji u 120 Chińczyków Han, 100 osób pochodzenia brytyjskiego lub 90 osób pochodzenia meksykańskiego, co sugeruje, że przewaga tego wariantu może być zbyt mała, aby można ją było wykryć w próbce tego rozmiaru.
Dyskusja
Zidentyfikowaliśmy mutację C5 u japońskich pacjentów z PNH. Mutacja ta zapobiega wiązaniu i blokowaniu przez ekulizumab, zachowując jednocześnie zdolność funkcjonalną zmutowanego C5 do wywołania hemolizy.
Dwaj pacjenci z PNH włączonymi do badania klinicznego AEGIS nie mieli charakterystycznej odpowiedzi na leczenie ekulizumabem, o czym świadczy brak zmiany markerów hemolitycznych, takich jak poziomy LDH
[przypisy: przegladarka skierowan, stomatologia mokotów, usg jamy brzusznej szczecin ]

Powiązane tematy z artykułem: przegladarka skierowan stomatologia mokotów usg jamy brzusznej szczecin